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猪场常用的5种猪圆环苗区别你知道吗?

2016-08-25 04:03 | 网络整理 |
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  猪圆环病毒(PCV) 是圆环病毒科、动物圆环病毒属的成员。该病毒科是国际病毒分类委员会(ICTV) 第6 次学术报告会新命名的一个科,是目前已知能自行复制的最小的哺乳动物病毒。PCV可以分为PCV1 和PCV2 两种血清型。PCV1 无致病性,但广泛存在猪体内及猪源代细胞系,1974 年,Tischer 首次从PK-15 猪肾传代细胞系中分离。PCV2 具有致病性,该病主要以进行性消瘦和多系统病理损伤为特征,可引起断奶猪和育肥猪生长缓慢、呼吸急迫、消瘦、贫血、出现黄疸现象,剖检后发现有淋巴结肿大、肝硬变、多灶性黏液性气管炎、间质性肺炎和肾炎,给养猪业造成相当严重的经济损失。1991 年,在加拿大首次暴发该病,随后,世界各国和地区都有该病的报道,并在患断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎和肾病综合征(PDNS) 等病猪体内分离到PCV2,并证明PCV2 与这些严重威胁着养猪业的疾病密切相关。目前该病毒引起了国内外兽医界的广泛关注。

猪场常用的5种猪圆环苗区别你知道吗?

  1、病原学

  猪圆环病毒(PCV)是一种小的均匀对称的二十面体球形病毒、无囊膜、大小(17±1.3)nm。PCV1 的病毒结构蛋白为36 ku,而PCV2 的病毒结构核酸组成。PCV 在CsCl 中的浮密度为1.37g/cm3,沉降系数为52 S,分子质量为580 ku。PCV 对外界的抵抗力较强,在pH 为3的酸性环境中很长时间不被灭活。该病毒没有囊膜,对氯仿等有机溶剂不敏感,在56 ℃或70 ℃氯仿处理一段时间,不被灭活。在高温环境(72 ℃)也能存活一段时间。PCV 不具有血凝活性,不能凝集牛、羊、猪、鸡等多种动物和人的红细胞。

  2、PCV 的培养

  PCV 在原代胎猪肾细胞、恒河猴肾细胞BHK-21 细胞上不能生长,PCV2 可在Vero 细胞中繁殖复制,最初生长不佳,但随着代次的增加,生长状态逐渐变好。PCV 通常在PK-15 细胞内增殖,由于PK-15 细胞系中常污染有PCV1,且无论是PCV1 和PCV2都不形成CPE,所以在选择用于PCV2培养的细胞时,必须事先进行检测。

  3、基因组结构与特点

  PCV 基因组为单链环状DNA 分子。PCV1 基因组长度为1758 或1 759 bp,而PCV2 为1 767 或1 768 bp。两者之间仅有68% 的序列同源性,而PCV2毒株之间序列同源性均95% 以上。PCV基因组最惊人的特点就是出现互相嵌套的开放阅读框(ORF)。计算机软件预测PCV2 基因组中可能含有11 个开放阅读框。PCV11 个ORF中只有ORF1和ORF2 的长度超过600 bp。PCV1 和PCV2 的ORF1 和ORF2 大小几乎相同,其他9个ORF 除了ORF9 和ORF10以外,PCV2 都比PCV1 小,PCV1 在ORF1、ORF2、ORF4、ORF5、ORF6和ORF10 编码的蛋白中含有糖基化位点,而PCV2 仅在ORF1、ORF4 中含有糖基化位点。ORFl和ORF2 为主要阅读框,ORFl 编码与病毒复制相关的Rep 蛋白,而ORF2 编码病毒的主要结构蛋白,即病毒核衣壳蛋白(Cap),研究表明Cap 蛋白与PCV2的免疫保护性有关。ORF1 变异较小,而ORF2变异较大。最近第3 个病毒基因ORF3被确定,ORF3 蛋白是一个高度保守的蛋白,在PCV2 各分离株之间氨基酸同源性达到95% 以上。其余的比较小的ORFs 的功能尚不明确。

  4、流行特点

  猪是PCV2 的天然宿主,各种年龄、不同性别的猪都可感染病毒,但以哺乳期和育成期的猪最易感,尤其是5 ~ 12周龄的仔猪,一般于断奶后2 ~ 3 d 开始发病,急性发病猪群中,病死率可达10%,在疾病流行感染过的猪群中,发病率和死亡率都较低,如果并发或继发细菌或病毒感染可使死亡率大大增加。加拿大是首次报道PMWS 的国家,但时至今日,多数农场的猪群中仍然只是散发,很少呈流行性发生PMWS,但是与PCV2 有关的PNDS、心肌炎和繁殖障碍综合征等疾病正引起了人们更多的关注。在美国,PCV2 感染和猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流感病毒引起的疾病相比较轻,发病慢而缓和,人们对PCV2 是否引起呼吸道疾病综合征(PRDC) 这一问题仍存在异议。PCV2 感染10 ~ 12 周龄肥育猪,死亡率10% ~ 15%,淘汰率5% ~ 10%,哺乳猪死亡率不足2%。此外英国、法国、德国、意大利、北爱尔兰、西班牙、新西兰、墨西哥、阿根廷丹麦、韩国、日本等均有本病的发生和报道。血清学调查表明,PCV2 感染广泛,多数猪群血清阳性率为20% ~ 50%。在北美和欧洲猪群中,发病率占被侵袭猪群的5% ~ 10%,发病死亡率达100%,德国屠宰猪血清中抗体阳性率达85%,英国随机采集的猪血清样品中血清阳性率达80%。比利时对1985—1999 年不同类型猪血清样品检测表明,PCV2 阳性率达100%,郎洪武等应用ELISA 法对我国7 省市不同类型猪群559 份样品进行检测,总阳性率达42.9%,表明PCV2感染在我国猪群中普遍存在。我国猪群中PCV2 感染情况也不容乐观。我国对PCV2 的研究始于1999 年底,有学者对我国部分猪群的流行病学调查发现猪群中广泛存在PCV2 抗体。

  5、疫苗研究进展

  5.1 灭活疫苗

  采用人工培养大量繁殖免疫原性好的病原微生物,灭活、浓缩后按一定比例加入佐剂制成的疫苗,称为灭活疫苗,该疫苗可由病原微生物的完整个体组成,也可由其某些片段组成。灭活疫苗具有无毒、无害、效果稳定的优势。国内外对猪圆环病毒灭活疫苗的研究已取得了巨大进展。法国梅利亚公司研究、开发的PCV2 油包水乳剂灭活疫苗,在欧洲一些国家已注册上市,免疫后备母猪经产母猪,仔猪可通母源抗体获得保护,实验和临床证明,该疫苗有较好的效果,可减少感染、排毒,减轻临床症状。国内现有3 种自主研发的猪圆环病毒常规灭活疫苗获准生产上市,其中PCV2 灭活疫苗LG 株由哈尔滨兽医研究所研制,该产品免疫应答快,效果好。另有南京农业大学研发的PCV2灭活疫苗SH 株和北京大北农集团研制的PCV2 灭活疫苗DBN-SX07 株。

  5.2 弱毒疫苗

  采用抗原性好的无毒株、天然弱毒株或人工诱变的弱毒株制成的疫苗称为弱毒疫苗,该类疫苗具有不少优点如接种数量少,可刺激机体产生细胞免疫、体液免疫和黏膜免疫,免疫效果好等,但也存在一些缺点如可能会发生毒力返强,储存和运输需在冷冻条件下,易失活,易被细菌污染等。Fenaux 等将PCV2 于PK-15细胞上传120 代, 结果120 代病毒比初代病毒滴度高出一个log 单位,同时,传30 代后Cap 基因110 位脯氨酸变为丙氨酸(P110A) 并维持到120 代,此外191 位精氨酸变为丝氨酸(R191S),突变毒株在猪体内的接种实验表明,PCV2120 代病毒血症时间和猪血清病毒含量明显低于第1 代,即PCV2120 代明显致弱。也有人将PCV2 的ORF2 克隆到缺失ORF2的PCV1 的骨架中,得到PCV1-2 嵌合型病毒。研究表明,该嵌合型病毒是减毒的,能刺激机体产生特异性免疫反应,可作为制备PCV 弱毒疫苗的优势毒株,且具备不易发生毒力返强的优势。

  5.3 亚单位疫苗

(责任编辑:徽牧小编)
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